實驗失(shi)敗時(shi)，最害怕的是什么？

對，就是對失敗的(de)原因(yin)一無(wu)所知。

我們會懷(huai)疑(yi)儀器(qi)試劑、懷(huai)疑(yi)實(shi)驗方法(fa)、

懷疑操作流程，甚至懷疑人(ren)生。

常常有實(shi)驗員(yuan)哭訴，為什么免疫學實(shi)驗

又雙(shuang)叒叕失敗了？

殊不知，問(wen)題(ti)很有可能出現在選(xuan)抗體上。

我們都(dou)知道，WB、IHC、ELISA 等常(chang)規實(shi)(shi)驗(yan)技術都(dou)不(bu)離開抗(kang)(kang)體，抗(kang)(kang)體的質量優劣關乎實(shi)(shi)驗(yan)的成(cheng)敗，一旦抗(kang)(kang)體造假，不(bu)僅浪費了科(ke)研者(zhe)的寶(bao)貴(gui)時間、金錢及(ji)實(shi)(shi)驗(yan)材(cai)料，甚至有(you)可能讓研究者(zhe)誤(wu)入歧(qi)途（得(de)出(chu)一系列錯(cuo)誤(wu)的實(shi)(shi)驗(yan)結果或(huo)重復性差(cha)），而這無形(xing)中會損害他們所作出(chu)的努力(li)以及(ji)學術聲譽。

抗體(ti)造假，是整(zheng)個試(shi)劑行業最嚴重的現象。據權威機構顯示，在上千(qian)份抗體(ti)產品質(zhi)量投(tou)訴(su)中，假貨問題占了(le) 43%；在 500 份問卷調查中，有 43％ 的人曾使用假冒偽劣試(shi)劑耗材；703 位生物學家，50% 無法重復自(zi)己(ji)的實驗結果。

抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)造(zao)假手段可謂是五(wu)花八門，比如：直接(jie)造(zao)假（根本(ben)不(bu)知道瓶子里裝的是什(shen)么）、用(yong)(yong)分(fen)子量接(jie)近的廉價抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)冒充(chong)昂貴的稀有抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)（很(hen)難檢(jian)測出(chu)來(lai)）等，最常見的就是稀釋(shi)抗(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)，把一份試劑稀釋(shi)成 5 份，導致效(xiao)價下降，有時有用(yong)(yong)，有時沒用(yong)(yong)。

關于抗體質(zhi)量穩定性和(he)可靠性問(wen)題，早在 08 年，瑞(rui)士科研(yan)項目 HPA 就曾(ceng)對(dui) 29 家供應商的 9,000 多(duo)種抗體（包括單抗和(he)多(duo)抗）進行 WB 和(he) IHC 驗證，來檢測(ce)這些抗體是否有效。

其(qi)結(jie)果(guo)竟令人大跌眼鏡：49% 的抗體(ti)完全無效(xiao)(xiao)，且(qie)僅有 7% 的抗體(ti)被認為是完全有效(xiao)(xiao)且(qie)擁有前后實驗一致性。據(ju)估計(ji)，每年因購(gou)買質量差(cha)的抗體(ti)導致的損(sun)失(shi)達到(dao) 8 億美金。

而抗體(ti)之所以這么不穩定并難以產生有效性，究其原因(yin)，一方面是因(yin)為(wei)(wei)抗體(ti)市場(chang)龐雜帶來了抗體(ti)質量的殘次不齊，另一方面則是因(yin)為(wei)(wei)抗體(ti)本身就具有抗原交叉反應性、多樣性和實驗差異性，進而也會影響抗體(ti)的特異性和親和性。

即使是(shi)未經污染的抗(kang)體有時也會給實(shi)驗帶來困難(nan)，不同批次的抗(kang)體可能存在(zai)自然差異，它們可能靶(ba)向(xiang)研究者(zhe)預期(qi)之外的蛋白質。所以陰性(xing)結(jie)果可能是(shi)多種原(yuan)因(yin)導(dao)致(zhi)的，這種不確定性(xing)使得假(jia)冒試劑很(hen)難(nan)被發現。

現(xian)階段我(wo)們身處于抗體(ti)亂象(xiang)泥(ni)潭之中(zhong)，如(ru)何獲得(de)一支真正有效的(de)優質抗體(ti)？如(ru)何選(xuan)擇和購買(mai)抗體(ti)是關鍵，想(xiang)要買(mai)到性價比高的(de)抗體(ti)，有沒有「潛」規則，如(ru)何煉就(jiu)自己(ji)的(de)火(huo)眼金(jin)睛？請(qing)繼續往下(xia)看(kan)。

一、抗體最基本的信息

1. 要(yao)購(gou)買的抗(kang)體名稱(cheng)（基因名，蛋白名都(dou)可以(yi)，比(bi)如 AKT）

2. 要用(yong)于(yu)什么實驗（可用(yong)于(yu)多種實驗，比如 WB / IHC / FCM / IF）

3. 樣本是什么(me)種屬（可用(yong)于多(duo)種種屬，比如(ru) human / mouse / rat / rabbit）

4. 如果(guo)是磷(lin)(lin)酸(suan)化(hua)抗體的(de)(de)：對磷(lin)(lin)酸(suan)化(hua)位(wei)點是否有要(yao)求，最好提(ti)供要(yao)檢測(ce)的(de)(de)磷(lin)(lin)酸(suan)化(hua)位(wei)點，如果(guo)使(shi)用者對磷(lin)(lin)酸(suan)化(hua)位(wei)點沒有要(yao)求的(de)(de)，就由查(cha)到的(de)(de)品牌廠家來推薦，廠家會推薦他們賣得(de)比較多而且效(xiao)果(guo)比較好的(de)(de)磷(lin)(lin)酸(suan)化(hua)抗體。

二、單(dan)克隆(long)和(he)多(duo)克隆(long)的選擇 

有(you)人認為單抗(kang)比多(duo)抗(kang)好(hao)，其實這并不(bu)是一個嚴謹的觀點，只能(neng)說在可能(neng)性上單抗(kang)的特異性更好(hao)一些，而多(duo)抗(kang)的親和力會優(you)于單抗(kang)，并且特異性并不(bu)一定(ding)就遜于單抗(kang)，主要看(kan)抗(kang)原(yuan)的設計(ji)水平。

不(bu)(bu)建議糾結于單抗(kang)好(hao)(hao)還是(shi)多(duo)抗(kang)好(hao)(hao)。在選擇上一(yi)般(ban)建議實(shi)驗(yan)種屬和(he)抗(kang)體種屬親緣性越遠(yuan)越好(hao)(hao)，不(bu)(bu)宜同(tong)源。

三、抗(kang)體選擇的(de)「潛」規則(ze)  

1. 質(zhi)量好，價(jia)格(ge)便宜（性價(jia)比高，索萊(lai)寶(bao)產(chan)品價(jia)格(ge)是國外的 1/3 左右(you)，而且有(you)小包裝(zhuang)規格(ge)）；

2. 到(dao)貨速度快（國(guo)外公司一(yi)般3~4周(zhou)，索萊(lai)寶公司大多有現貨，最多 1 周(zhou)）；

3. 售前售后有保障(zhang)（國外抗(kang)體(ti)咨詢(xun)投訴(su)周期(qi)一(yi)般(ban)(ban)都非常(chang)長，索(suo)萊(lai)寶公司一(yi)般(ban)(ban) 1 周就(jiu)可以(yi)解決，還可以(yi)免費(fei)索(suo)取一(yi)些抗(kang)體(ti)小樣，抗(kang)體(ti)免費(fei)試(shi)用活動正在火(huo)熱進(jin)行）；

4. 抗體(ti)的(de)運用可以(yi)多種實(shi)驗，反應物種可以(yi)多樣（實(shi)驗必須是同(tong)一類實(shi)驗，別人做 IHC 的(de)抗體(ti)用做 WB 可能是沒有結果的(de)）；

5. 廠(chang)家(jia)官(guan)網發(fa)布出的(de)(de)(de)(de)實(shi)(shi)驗(yan)(yan)效果圖（完善的(de)(de)(de)(de)驗(yan)(yan)證(zheng)數(shu)據及(ji)詳細的(de)(de)(de)(de)信息(xi)標(biao)(biao)準(zhun)是(shi)優質抗體(ti)選擇的(de)(de)(de)(de)必要條(tiao)件），比(bi)如是(shi)否明(ming)確(que)標(biao)(biao)注其可以用(yong)于 WB、IHC 等實(shi)(shi)驗(yan)(yan)、是(shi)否有足夠的(de)(de)(de)(de)數(shu)據支持證(zheng)明(ming)該抗體(ti)適用(yong)于某一組織或者樣本(ben)（樣本(ben)的(de)(de)(de)(de)處理過(guo)程和(he)要求）、是(shi)否有明(ming)確(que)的(de)(de)(de)(de)抗體(ti)建議稀釋濃度(du)、該抗體(ti)的(de)(de)(de)(de)識別(bie)位(wei)點是(shi)連(lian)續的(de)(de)(de)(de)氨基酸(suan)序列的(de)(de)(de)(de)一級結構(gou)還是(shi)非連(lian)續性(xing)氨基酸(suan)的(de)(de)(de)(de)三維結構(gou)位(wei)點，天(tian)然的(de)(de)(de)(de)還是(shi)變性(xing)的(de)(de)(de)(de)……這(zhe)些信息(xi)和(he)數(shu)據的(de)(de)(de)(de)真(zhen)實(shi)(shi)性(xing)及(ji)完整性(xing)是(shi)保(bao)證(zheng) WB、IHC 等實(shi)(shi)驗(yan)(yan)順(shun)利(li)進行的(de)(de)(de)(de)關鍵；

6. 別找純(chun)代工(gong)的品牌多花冤枉(wang)錢，制造和生(sheng)產型的供應商(shang)對(dui)自(zi)己產品更加(jia)了解(jie)，出現問題(ti)容易找到原因(yin)；

7. 一定(ding)要從正規渠(qu)道購買（生產商和(he)制造商或正規的授權經銷商）；

8. 有效的(de)(de)內(nei)參抗(kang)(kang)體是實(shi)(shi)驗(yan)結果真實(shi)(shi)可靠的(de)(de)重要(yao)憑證，尤(you)其在 WB 實(shi)(shi)驗(yan)中，常會借助內(nei)參來校(xiao)正(zheng)蛋白定(ding)量、上(shang)樣過程中存在的(de)(de)實(shi)(shi)驗(yan)誤差。值得(de)注意的(de)(de)是，不同的(de)(de)內(nei)參抗(kang)(kang)體只適用于一定(ding)范圍的(de)(de)樣本和組織，我們需要(yao)查(cha)閱參考文獻，并根據樣本和組織的(de)(de)差別選擇(ze)合適的(de)(de)內(nei)參抗(kang)(kang)體，以確(que)保(bao)實(shi)(shi)驗(yan)的(de)(de)準(zhun)確(que)性，索(suo)萊寶擁有完備的(de)(de)標簽內(nei)參抗(kang)(kang)體庫；

9. 常言(yan)道，實(shi)踐是(shi)檢驗(yan)真理的(de)(de)(de)唯一標準，對(dui)于文獻或官網中現成的(de)(de)(de)已經驗(yan)證過的(de)(de)(de)親(qin)和力高(gao)、特異性(xing)強的(de)(de)(de)抗(kang)體(ti)，我(wo)們只需將拿來(lai)主義進(jin)行到底即可(ke)。此時(shi)仍需要特別(bie)注意(yi)的(de)(de)(de)是(shi)文章的(de)(de)(de)可(ke)靠(kao)性(xing)（IF>5 最好(hao)(hao)）；即便(bian)如此，在相應抗(kang)體(ti)購買回來(lai)后，建議做(zuo)些(xie)簡單預實(shi)驗(yan)來(lai)保證抗(kang)體(ti)的(de)(de)(de)特異性(xing)。如果只有(you)陽性(xing)有(you)條帶，陰(yin)性(xing)沒(mei)有(you)條帶，恭喜你，你確實(shi)買到了一支靠(kao)譜的(de)(de)(de)好(hao)(hao)抗(kang)體(ti)，可(ke)以放(fang)心大(da)膽(dan)的(de)(de)(de)開始正式實(shi)驗(yan)了。

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