外(wai)源性(xing)DNA屬于生物制品工(gong)藝(yi)相關雜(za)(za)質(zhi)，對其含量進行檢(jian)測可(ke)以確認產品純(chun)化工(gong)藝(yi)是否合理，即能否有效去除外(wai)源DNA殘(can)余；同(tong)時可(ke)確認產品中雜(za)(za)質(zhi)含量是否符合標準要(yao)求，該檢(jian)測值(zhi)是生物制品質(zhi)量控制的重(zhong)要(yao)參數之一。

致癌性風(feng)險：現(xian)存的主要致癌機制是引入的顯性(xing)致癌基因(yin)（如(ru)真核生物中廣(guang)泛(fan)存在(zai)的ras基因(yin)），通過直接轉化使得部分正(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao)分化為(wei)瘤性(xing)細(xi)胞(bao)。

免疫原性風(feng)險(xian)：細菌基因組富含的CpG組分和未(wei)甲基化修飾的序列會刺(ci)激非特異性免(mian)(mian)疫反應，增加(jia)免(mian)(mian)疫原性風險。

致突變(bian)性(xing)風險：哺乳動物細胞基(ji)因(yin)組中含有高拷貝數的轉座子，可(ke)通過異位重排改變基(ji)因(yin)組從而(er)致突變。

美(mei)國藥典：規定成品中(zhong)殘留DNA不(bu)高于10 ng/劑(ji)、長度不(bu)大于200 bp；

歐洲藥典(dian)：規定殘留DNA不超(chao)過(guo)10 ng/劑，具(ju)體可接受限(xian)度需由權威機(ji)構批準。

熒(ying)光染色法

應用熒光(guang)染料(liao)picogreen與雙鏈DNA結合(he)形(xing)成(cheng)復合(he)物，在(zai)(zai)480 nm激發光(guang)、520 nm接收光(guang)下檢測(ce)，在(zai)(zai)一定(ding)的(de)DNA濃度范圍及熒光(guang)染料(liao)過量的(de)條件下熒光(guang)強度與DNA濃度成(cheng)正比，根(gen)據熒光(guang)強度計算樣本中DNA殘留(liu)量。

該方法操作簡單、成本低廉、無需純化DNA；純DNA條件下靈敏度為0.2 ng/ml，基質中單鏈DNA和RNA對檢測影響較小，高濃度蛋白對檢測有干擾，故疫苗類產品經方法學驗證后是可以使用的，但不適用于高劑量的蛋白類制品；該方法對各類DNA具有通用性，無需對不同類型DNA設計特異性探針，但也因其特異性差易受環境中DNA污染。

定量PCR法

對外(wai)源性(xing)(xing)DNA設計特異(yi)性(xing)(xing)引物(wu)和熒(ying)光標(biao)記的(de)(de)探針，以反(fan)應體(ti)系(xi)(xi)中熒(ying)光數(shu)值(zhi)反(fan)映特異(yi)性(xing)(xing)擴增產(chan)物(wu)量(liang)(liang)，當反(fan)應過程中熒(ying)光強度達(da)到預設的(de)(de)閾值(zhi)時，體(ti)系(xi)(xi)的(de)(de)PCR循環數(shu)與該體(ti)系(xi)(xi)所含有的(de)(de)起(qi)始DNA模板量(liang)(liang)的(de)(de)對數(shu)呈線性(xing)(xing)關系(xi)(xi)，依(yi)據DNA標(biao)準(zhun)品測定樣本中外(wai)源性(xing)(xing)DNA殘留量(liang)(liang)。

該方法序列特異性強、靈敏度高（fg級）、重現性好，是中國藥典、美國藥典和歐洲藥典均推薦的方法；靶標區域的選擇、引物和探針的特異性、DNA標準品質量對方法的靈敏度和準確度有較大影響，需針對不同外源性DNA開發特異的檢測體系和DNA標準品。

免(mian)疫閾值法

應(ying)用單(dan)鏈DNA結合(he)蛋白捕獲變性的(de)單(dan)鏈DNA，然(ran)后(hou)(hou)用尿(niao)素(su)(su)酶標記的(de)抗-DNA抗體與結合(he)的(de)DNA反(fan)應(ying)，以尿(niao)素(su)(su)酶水(shui)解尿(niao)素(su)(su)后(hou)(hou)溶液(ye)pH變化反(fan)應(ying)體系(xi)中DNA含量(liang)(liang)，經DNA標準品計(ji)算殘(can)留DNA含量(liang)(liang)。

該方法靈敏度高（1-3 pg），有標準化操作流程，但依賴單鏈DNA結合蛋白和抗-DNA單克隆抗體兩種蛋白與DNA的結合，費用較高且需片段不小于600 bp。