2020版中國藥典（ChP）雖然并未收錄NAT法作為支原體檢測方法，但其中也提到了“也可采用經國家藥品檢定機構認可的其他方法”。傳統的培養法和DNA染色法雖然有著自身的優點，但較長的檢測周期和較大的樣品檢測用量逐漸不能滿足行業快速發展的需求。NAT方法從當前支原體快速檢測方法中脫穎而出，已經被美國藥典、歐洲藥典和日本藥典收錄，并明確提到NAT方法在經過適當驗證后，可用于檢測方法補充或替代藥典方法進行放行檢測。

下表為傳統的支原體檢測(ce)方法單次檢測(ce)對應樣品量和(he)檢測(ce)周期(qi)：

相對于傳統方法，Q-PCR方法只需要很少的樣品量（視靈敏度調整，按USP示例，最少可為0.2ml），若結果為陰性最快可以在24h內匯報結果。但是容易受到其他因素干擾導致出現“假陽性、假陰性”結果，所以針對該方法的驗證工作極為重要。NMPA于2017年發布了《細胞治療產品研究與評價技術指導原則》，提出可(ke)以采用快速、微量的新型檢測方法。研究者應對新型檢驗方法與傳統檢測方法進行比較和評估，必要時，在產品放行檢驗時可以采用兩種檢驗方法進行相互驗證。

對于如何進行NAT方法(fa)的驗證，目前歐(ou)洲藥典<2.6.7>和日本藥典里都詳細介紹，其內容基本一(yi)致(zhi)。中檢院(yuan)也發(fa)表(biao)了(le)文(wen)章《支(zhi)(zhi)原體(ti)檢查的核(he)(he)酸(suan)檢測(ce)方法(fa)及方法(fa)學驗證的思(si)考(kao)》，以(yi)期(qi)對我國支(zhi)(zhi)原體(ti)核(he)(he)酸(suan)擴增法(fa)檢測(ce)的研發(fa)者及使(shi)用者提(ti)供借鑒(jian)。支(zhi)(zhi)原體(ti)NAT法(fa)須進行專屬(shu)性（Specificity）、檢測(ce)限（Detection Limit）和耐用性（Robustness）驗證。

● 2020版(ban)中國藥典三部(bu)《生物(wu)制(zhi)(zhi)品生產(chan)(chan)檢定用動物(wu)細胞(bao)基質制(zhi)(zhi)備(bei)及質量控(kong)制(zhi)(zhi)》中提出對于生產(chan)(chan)用細胞(bao)，需要對主細胞(bao)庫（MCB）、工作細胞(bao)庫（WCB）、生產(chan)(chan)終末細胞(bao)（EOPC）進行支原體檢查；通則(ze)9201 藥品微(wei)生物(wu)檢驗替代方(fang)法驗證指導(dao)原則(ze)

● 《免(mian)疫細胞治(zhi)療產品藥學研究與評價(jia)技(ji)術指導原(yuan)則（試行）》中(zhong)(zhong)建(jian)議在關鍵時間(jian)點對適(shi)合的中(zhong)(zhong)間(jian)樣(yang)品開展支(zhi)原(yuan)體等安全性(xing)相(xiang)關檢測(ce)或(huo)采取相(xiang)關的措施加以控制，并且支(zhi)原(yuan)體同(tong)樣(yang)需(xu)要作為終產品的放行檢項(xiang)

● FDA,Guidance for Industry:Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications，中提出對(dui)于原材料、病毒種子、未加工的收獲液(ye)等(deng)都需要進(jin)行支原體控(kong)制

●  EP 10.0 2.6.7 Validation of nucleic acid amplificationtechniques (NAT) for the detection of mycoplasmas: guidelines