珈創(chuang)生物 —— 生物技(ji)術服務與研發為一體的高新(xin)技(ji)術企業
優質高效透明
High quality, efficient and transparent
中國藥典要求對細胞系進行檢定，NMPA、FDA、EMA、世界衛生組織（WHO） 和人類用藥注冊技術要求協調國際會議（ICH）的各種法規文件概述了對細胞庫檢定的要求和指導，以確認細胞的起源和歷史，并鑒定和測試細胞的身份，穩定性和純度。
細胞檢定主要包括幾個方面：細胞鑒別、無菌檢查、支原體檢查、內外源病毒因子檢查、成瘤性/致瘤性檢查等。
這些檢測項目對于 MCB 細胞和 WCB 細胞及生產限定代次細胞均適用。
我們建議在藥物生產的各個階段對哺乳動物和非哺乳動物細胞系進行檢定，包括：
主細胞庫（MCB） 工作細胞庫（WCB） 生產終末細胞（EOPC） 病毒種子庫（VSS） 原材料及最終產品
細胞系檢測(ce)
細(xi)胞鑒(jian)別試驗
新建細胞系/株、細胞庫和生產終末細胞應進行鑒別試驗，以確定為本細胞，且無其他細胞的交叉污染。珈創生物提供多種鑒別試驗，客戶可選擇一種或多種方法對其細胞系/株進(jin)行種屬鑒別。
染色體核型(xing)分析
核型(xing)(xing)分(fen)析(xi)的結果(guo)可以確認樣品的細(xi)胞(bao)系(xi)身(shen)份(fen)和來源(yuan)物(wu)種。我們擁(yong)有多種細(xi)胞(bao)（包括人源(yuan)細(xi)胞(bao)，人源(yuan)干(gan)細(xi)胞(bao)，猴 Vero，倉鼠 CHO）核型(xing)(xing)細(xi)胞(bao)分(fen)析(xi)的豐富經驗。
染色(se)體(ti)核(he)型分(fen)析(xi)包括(kuo)但不限于：中期染色(se)體(ti) G 顯帶分(fen)析(xi)和(he)染色(se)體(ti)計數（提供二倍體(ti)染色(se)體(ti)數，頻率(lv)分(fen)布和(he)多倍體(ti)水平(ping)）。
同工酶試驗
對細胞乳酸(suan)(suan)脫氫(qing)酶(mei)（LD）、6-磷酸(suan)(suan)葡萄糖脫氫(qing)酶(mei)（G6PD）和核苷磷酸(suan)(suan)化酶(mei) （NP）三種(zhong)酶(mei)分別進行凝膠電泳試驗(yan)，并通(tong)過與指示細胞對比(bi)，確定(ding)有無交(jiao)叉(cha)污染(ran)。
短串聯重復(fu)序列分析(STR)
STR（短串(chuan)聯重(zhong)復序列）分(fen)析法即通過提取樣(yang)品(pin) DNA，PCR 擴增 STR 位(wei)點(dian)， PCR 產物檢測(ce)，檢測(ce)結果分(fen)析，并與 ATCC 和(he) DSMZ 數據(ju)庫(ku)進行比對，以(yi)確定樣(yang)品(pin)種屬來源(yuan)，判(pan)斷其是(shi)否存在其他人源(yuan)細胞(bao)交叉污染。
無菌檢查(cha)
參考中(zhong)(zhong)國藥典(dian)通則 1101，提供符合法(fa)規要求(qiu)的(de)薄膜過(guo)濾法(fa)和直接(jie)(jie)接(jie)(jie)種法(fa)。無菌(jun)檢查均在 A 級隔(ge)離器或 C+A 級環(huan)境(jing)中(zhong)(zhong)進行(xing)(xing)，且在檢測(ce)過(guo)程中(zhong)(zhong)持續進行(xing)(xing)環(huan)境(jing)監(jian)測(ce)。
適(shi)用(yong)性(xing)檢查：均可按照法(fa)規的要求，對不同的供試(shi)品進行適(shi)用(yong)性(xing)試(shi)驗(yan)。 以確(que)認所采用(yong)的方法(fa)適(shi)合供試(shi)品的無菌檢查。
薄膜過濾(lv)(lv)法(fa)：采用封閉式薄膜過濾(lv)(lv)器，可(ke)過濾(lv)(lv)大量供試(shi)品以及利于解決供試(shi)品中可(ke)能(neng)存(cun)在微生物(wu)生長抑制劑等問題。是可(ke)過濾(lv)(lv)供試(shi)品首選的檢(jian)測方(fang)法(fa)。
直接(jie)接(jie)種法(fa)：適用于(yu)無法(fa)用薄膜(mo)過濾(lv)法(fa)進行(xing)檢測的(de)供試(shi)(shi)品，包括混懸液等非(fei)澄(cheng)清水溶液、固體供試(shi)(shi)品、非(fei)水溶性供試(shi)(shi)品和滅菌醫(yi)療器械等。
分枝桿菌檢查
珈創(chuang)生(sheng)物(wu)參考(kao)中(zhong)(zhong)國藥典通則 1101，采用 Middlebrook 7H10 平(ping)板培(pei)養法，提(ti)供符合法規要求(qiu)的分枝桿菌檢查(cha)。檢查(cha)均在A級隔離器(qi)或C+A級環境中(zhong)(zhong)進行，且(qie)在檢測(ce)過程中(zhong)(zhong)持續(xu)進行環境監測(ce)。
支原(yuan)體檢查
珈(jia)創生物參(can)考中國藥典通(tong)則 3301，提供(gong)符(fu)合法規要(yao)求的(de)支原(yuan)體檢查包(bao)括培(pei)養法和指示細胞培(pei)養法（DNA 染(ran)色法）。
培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)法：供(gong)試品分別接種(zhong)(zhong)固體(ti)(ti)和(he)液(ye)體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基，于(yu)接種(zhong)(zhong)一周后(hou)取液(ye)體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基轉種(zhong)(zhong)進行次代(dai)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)，觀察初代(dai)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)和(he)次代(dai)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)結果(guo)。
指示細胞培(pei)養法（DNA 染色(se)法）：供(gong)試品接種于(yu)對照(zhao)細胞，培(pei)養 3-5 天后傳代再(zai)培(pei)養 3-5 天，于(yu)培(pei)養期末進(jin)行染色(se)觀察。
內外源病毒(du)污(wu)染檢查
檢(jian)查(cha)細胞系/株(zhu)中(zhong)(zhong)是否有來源(yuan)(yuan)物(wu)種中(zhong)(zhong)潛在的(de)可傳染(ran)的(de)病(bing)毒(du)(du)，以及(ji)由(you)于(yu)使用(yong)的(de)原 材(cai)料或操作帶入的(de)外源(yuan)(yuan)性病(bing)毒(du)(du)。細胞進(jin)行病(bing)毒(du)(du)檢(jian)查(cha)的(de)種類及(ji)方(fang)法，須根據細胞種屬(shu)來源(yuan)(yuan)、組織(zhi)來源(yuan)(yuan)、細胞特性、傳代歷史、培(pei)養方(fang)法及(ji)過程等確定(ding)。 在您開展檢(jian)測(ce)前，珈創愿(yuan)意與您進(jin)行充分的(de)溝通，確定(ding)合適的(de)檢(jian)測(ce)方(fang)案。
細胞形態觀(guan)察及(ji)血吸附(fu)試驗(yan)
體外(wai)不同指示細胞接(jie)種培養法
動物(wu)體內接種(zhong)法
乳鼠腦內(nei)及腹(fu)腔接種法
小鼠腦內及腹腔接種法
豚鼠(shu)腹(fu)腔(qiang)接種法
家兔皮(pi)內及皮(pi)下接(jie)種法
雞胚接種法
雞胚卵黃(huang)囊接種法
雞胚尿囊腔接(jie)種及尿囊液(ye)血凝試驗
逆轉錄(lu)病(bing)毒檢測
逆(ni)轉錄酶(mei)活性測定(ding)法 PERT
感染性試驗
透射電鏡觀(guan)察法
種屬特異性外源病毒因(yin)子檢測
應根據細胞系/株種(zhong)屬來源、組織來源及供體(ti)健康狀況(kuang)等(deng)確定檢測病毒的種(zhong)類。
鼠(shu)源細(xi)胞系
鼠源病毒(du)檢(jian)查
人源細(xi)胞系(xi)/株
人(ren)源病毒檢測Q-PCR法
牛源性病(bing)毒檢(jian)測
細胞(bao)培(pei)養法
熒光(guang)抗體檢測法
豬(zhu)源性病毒檢測
細(xi)胞(bao)培養法
普通PCR法
Q-PCR法
其他特定病毒檢測
鼠細小(xiao)病毒檢測(ce)
細胞培(pei)養法
普(pu)通PCR法
Q-PCR法(fa)
杯狀病(bing)毒（Vesivirus 2117）檢測--Q- PCR法 CHO細胞系
成瘤性檢查
動物體內(nei)接種法(fa)（裸鼠(shu)）
軟瓊脂克隆形(xing)成試(shi)驗
